Агар Рака Рей - Raka-Ray Agar

Описание
Агар Рака Рей используется для обнаружения молочнокислых бактерий в пиве и процессах пивоварения. Его использование рекомендовано Американским обществом химиков-пивоваров (ASBC) и Европейской конвенцией по пивоварению (EBC).
Члены семейства Lactobacillaceae, встречающиеся в процессе пивоварения, являются важными микроорганизмами, вызывающие порчу, потому что продукты, возникающие в результате их роста и метаболизма, часто серьезно портят вкус продукта. Обнаружение осложняется разнообразными потребностями микроорганизмов в питании и составе среды.
Агар Рака Рей был разработан для того, чтобы пивовары могли быстро и точно контролировать производимое пиво на наличие широкого спектра организмов, включая педиококки.
Исследования, в которых к Universal Beer Agar добавлялись различные комбинации агентов, стимулирующих рост, привели к обнаружению ряда агентов, включая моноолеат сорбитана, экстракт печени, дрожжевой экстракт и N-ацетилглюкозамин, которые дали превосходные результаты в отношении размера колоний. количество колоний и время инкубации по сравнению с немодифицированным универсальным пивным агаром.
Эти исследования легли в основу формулы Raka-Ray 3 Medium, в которую моноолеат сорбитана включен в качестве стимулятора молочнокислых бактерий в целом. Фруктоза присутствует в качестве основного источника углеводов для Lactobacillus fructivorans, в то время как мальтоза присутствует для выявления лактобацилл, которые не могут использовать глюкозу.
Приготовление
Развести 77,1 г в 1 литре дистиллированной воды. Добавьте 10 мл моноолеата сорбитана и 7 мл 0,1% раствора циклогексимида SR0222. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Остудить до 50-55 °C и асептически добавить 3 г фенилэтанола. Разлить по стерильным чашкам Петри или распределить по объемам 4 мл при 55 ° C, если будет использоваться метод наложения.
Методика
Посев на поверхность
0,1 мл образца распределяют по чашкам с агаром. Инкубируйте при 25–30 ° C в анаэробных условиях, используя набор Oxoid BR0038 с анаэробным сосудом Oxoid, в качестве альтернативы используйте AnaeroGen AN0025 или AN0035. AnaeroGen не требует добавления воды или использования активного катализатора. В качестве альтернативы образец можно отфильтровать и поместить мембрану на поверхность агара для инкубации.
Техника наложения
Соблюдая правила асептики, разлейте агар Raka-Ray объемом 4 мл в небольшие пробирки и храните его в расплавленном состоянии на водяной бане при температуре 55 ° C. Смешайте 1 мл исследуемого образца с 4 мл расплавленного агара и немедленно вылейте содержимое в чашку Петри, содержащую 15-20 мл твердого агара Рака-Рэя, чтобы получить хорошо распределенные колонии. Инкубируйте в анаэробных условиях при 25-30 ° C. Поскольку слой агара очень тонкий, отдельные колонии можно легко отбирать для дальнейшего исследования.
Условия культивирования
Инкубационного периода в 4 дня обычно достаточно, но для более медленно растущих организмов может потребоваться до 7 дней.
Из-за разнообразия условий окружающей среды, необходимых для роста молочнокислых бактерий, может потребоваться полуанаэробная атмосфера. Это достигается с помощью набора для производства газа Oxoid BR0056 в анаэробном сосуде Oxoid. В качестве альтернативы используйте CampyGen CN0025 или CN0035. CampyGen не требует добавления воды или использования активного катализатора.
Условия хранения и сроки годности
Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C вдали от солнечных лучей и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Приготовленную среду следует хранить при 2-8 °С.
Селективные добавки хранить при 2-8 °C.
Внешний вид
Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.
Готовая среда: гель соломенного цвета.