Мясной бульон - Cooked Meat Medium

Среда, приготовленная из сердечной мышцы, широко используется для культивирования анаэробных и аэробных организмов. Среда обладает способностью инициировать рост бактерий из образцов с очень низкой концентрацией микроорганизмов и поддерживать жизнеспособность культур в течение длительных периодов времени.

Добавление глюкозы в состав обеспечивает быстрый и интенсивный рост анаэробных бактерий за короткое время и приводит к более быстрой идентификации анаэробов.

Приготовление

Развести 10 г сухой питательной среды в 100 мл дистиллированной воды (или 1 г в 10 мл воды в пробирках). Дать постоять 15 минут, пока частицы мяса полностью не намокнут.

Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Не охлаждайте бутылки быстро, потому что при кипении из контейнеров будут вытеснены частицы мяса.

Методика

Анаэробные культуры

Предпочтительно использовать свежеприготовленную и стерильную среду, которую инокулируют, как только она остынет примерно до 35 °C. Пробирки, которые не использовались в день приготовления, следует поместить в кипящую водяную баню или пароварку примерно на 15 минут для удаления растворенного кислорода. Им следует дать остыть без перемешивания, а затем засеять.

Инокуляцию следует производить около дна пробирки на частицы мяса. Клостридии можно разделить на две основные группы по их действию на среду.

(i) Сахаролитические организмы

Быстро выделяется кислота и газ, но мясо не переваривается. Культуры могут иметь кисловатый запах, с покрасневшим белком.

(ii) Протеолитические организмы

Протеолиз вызывает разложение мяса с образованием дурно пахнущих соединений серы и почернением. Однако некоторые сахаролитические штаммы также производят сероводород, который вызывает почернение, но в меньшей степени.

Используйте только свежеприготовленную среду и инкубируйте до 21 дня при 35 °C. Ежедневно проверяйте наличие изменений в среде.

Аэробные культуры

Пробирка со средой инкубируется с незакрепленным колпачком, герметизация не требуется. Аэробы растут наверху, в то время как другие анаэробные штаммы растут глубже в среде. Инкубируйте до 7 дней при 35 °C с открытыми крышками. Ежедневно проверяйте наличие помутнения, газа или изменений частиц мяса.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду хранить при комнатной температуре в темноте с закрытыми крышками до 6 месяцев.

Внешний вид

Сухая среда: гранулы коричневого цвета.

Готовая среда: тёмно-соломенная с коричневыми гранулами.