Агар Байрд-Паркера (RPF) – Baird-Parker Agar Base (RPF)

Описание
Золотистый стафилококк - это грамположительный кокк, вырабатывающий энтеротоксин, который может вызвать пищевое отравление. Эти организмы могут присутствовать в небольших количествах во многих пищевых продуктах и, если им разрешено размножаться без контроля, могут образовывать очень термостойкие энтеротоксины. Способность Staphylococcus aureus продуцировать лецитиназу и липазу была признана в течение многих лет, и обнаружение этих ферментов в среде яичного желтка стало широко используемой процедурой для идентификации этого микроорганизма.
Кроличий агар с фибриногеном плазмы (RPF Agar) является модификацией среды Бэрда-Паркера и рекомендуется для селективного выделения, подсчета и подтверждения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов и других образцов.
Состав агара RPF сохраняет основу агара Бэрда-Паркера, которая была специально разработана для восстановления поврежденных клеток. Эта среда отличается от среды Байрда-Паркера тем, что эмульсия яичного желтка заменена фибриногеном, кроличьей плазмой и ингибитором трипсина. Фибриноген был добавлен для усиления коагулазной реакции в RPF Agar. Была выбрана кроличья плазма, и было обнаружено, что она более специфична по активности коагулазы по сравнению с другими источниками плазмы. Ингибитор трипсина был добавлен для предотвращения фибринолиза.
Добавка RPF Agar была модифицирована в одном отношении по сравнению с исходной рецептурой: содержание теллурита калия было снижено в четыре раза, то есть с 0,01% до 0,0025% мас. /об. Это сокращение было необходимо, поскольку в лаборатории Oxoid было обнаружено, что некоторые штаммы Staphylococcus aureus были чувствительны к теллуриту калия при использовании 0,01% мас. / об.
Приготовление
Развести 6,3 г агаровой основы Бэрд-Паркер (RPF) в 90 мл дистиллированной воды. Довести до кипения, чтобы оно полностью растворилось. Стерилизовать автоклавированием при 121 ° C в течение 15 минут. Охладите до 48 ° C и добавьте 1 флакон добавки RPF (SR0122), восстановленной в соответствии с указаниями. Хорошо перемешать и разлить по чашкам.
Агаровую основу Бэрд-Паркер (RPF) следует использовать только с добавкой RPF.
Методика
Метод посева на чашки
1. Подготовьте чашки с агаром RPF, как указано.
2. Гомогенизируйте образец пищи.
3. В отдельные чашки засевают 0,1 мл приготовленных образцов и их последующие десятичные разведения.
4. Инкубируйте при 35 ° C и исследуйте через 24 и 48 часов инкубации.
5. Подсчитайте все колонии с непрозрачным ореолом вокруг них. Не ограничивайте счет
черные колонии.
6. Укажите количество выделенных коагулазоположительных стафилококков на грамм пищи.
Метод наливной тарелки
1. Приготовьте агар RPF, как указано, и выдержите при 48 ° C.
2. Гомогенизируйте образец пищи.
3. Добавьте по 1 мл приготовленного образца (исходная суспензия и последующее десятичное разведение) в каждую стерильную чашку Петри.
4. Добавьте в асептических условиях 20 мл стерильного агара RPF и подготовьте чашки для заливки.
5. Инкубируйте при 35 °C и исследуйте через 24–48 часов.
6. Подсчитайте все колонии, вокруг которых есть непрозрачный ореол осадков.
7. Укажите количество коагулазоположительных стафилококков, выделенных на грамм пищи.
Условия хранения и сроки годности
Храните обезвоженную среду при температуре 10-30 ° C и используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Приготовленную среду использовать свежей.
Добавку Бэрд-Паркер (RPF) хранить при температуре ниже 0 ° C.
Внешний вид
Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.
Готовая среда: гель соломенного цвета.