Щелочная пептонная вода – Alkaline Peptone Water

Щелочная пептонная вода предназначена для обогащения холерных вибрионов и видов вибрионов из пищевых продуктов, воды и клинических образцов. Этот бульон также можно использовать для прямого микроскопического исследования образцов методом висящей капли. 2% (мас./об.) хлорида натрия, включённого в эту среду, способствует росту холерного вибриона, в то время как щелочность этой среды подавляет большую часть нежелательной фоновой флоры.
Приготовление
Добавьте 30 г на литр дистиллированной воды. Хорошо перемешайте, распределите по последним контейнерам и стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут.
Методика
Существуют различные методы изоляции видов Vibrio из образцов окружающей среды, пищевых продуктов и клинических образцов. Обычно они включают стадию предварительного обогащения, за которой следует посев на твёрдую среду и морфологическую, биохимическую и серологическую идентификацию. Было описано много различных сред обогащения, но из них только щелочная пептонная вода получила широкое распространение.
Обратитесь к соответствующим руководящим принципам или стандартам для формулировок и точной методологии.
Образцы продуктов питания и воды
См. соответствующий стандарт, например, APHA, FDA-BAM и ISO.
Для всех методов среды для посева следует инкубировать в течение суток, а затем проверить на наличие типичных колоний:
Среда для сахарозы, полимиксина B, додецилсульфата натрия (среда SPS): вибрионы, положительные по сахарозе, такие как Vibrio cholerae и Vibrio alginolyticus, имеют жёлтый цвет. Отрицательные по сахарозе виды, такие как Vibrio parahaemolyticus и Vibrio vulnificus, образуют сине-зелёные колонии. Организмы, продуцирующие сульфатазу, например, Vibrio vulnificus также обычно окружены ореолом осадков.
Среда TCBS для холеры (CM0333): вибрионы, положительные по сахарозе, такие как Vibrio cholerae и Vibrio alginolyticus, имеют жёлтый цвет на TCBS. Отрицательные по сахарозе виды, такие как Vibrio parahaemolyticus и Vibrio vulnificus, образуют сине-зелёные колонии.
Агар МакКонки (CM0007): Лактозотрицательные виды Vibrio образуют бесцветные колонии.
Биохимическое подтверждение: Vibrio spp. положительны на оксидазу и сбраживают глюкозу с образованием только кислоты. Поскольку тестирование на оксидазу может привести к ложноотрицательным результатам на средах, содержащих углеводы (например, TCBS), перед тестированием пересейте их на питательный или кровяной агар.
Условия хранения и сроки годности
Храните обезвоженную среду при температуре 10-30 °C и используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Приготовленную среду хранить при температуре 25 °C не более 1 месяца с момента приготовления.
Внешний вид
Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.
Готовая среда: прозрачная жидкость соломенного цвета.