Питательная среда Раппапорта-Вассилиадиса – Rappaport-Vassiliadis (RV) Enrichment Broth

Питательная среда Раппапорта-Вассилиадиса рекомендуется в качестве селективной среды обогащения при выделении сальмонелл из пищевых и экологических образцов. Его также можно использовать для выделения сальмонелл из фекалий человека без предварительного обогащения, но посевной материал должен быть небольшим.

Важно, чтобы размер посевного материала, используемого для обогащения культуры в бульоне RV, был достаточно малым, чтобы не влиять на его селективность. Было предложено соотношение посевной материал / бульон 1: 100-1: 2000.

Приготовление

Добавьте 30 г в 1 литр дистиллированной воды. Осторожно нагрейте до полного растворения. Разлить по 10 мл во флаконы или пробирки с завинчивающейся крышкой и стерилизовать в автоклаве при 115 °C в течение 15 минут.

Методика

Анализ продуктов питания и образцов из окружающей среды

1. Приготовьте буферную пептонную воду (Oxoid CM0509), согласно инструкции, содержащих 225 мл среды.

2. Приготовьте бульон для обогащения Раппапорта-Вассилиадиса (RV) в соответствии с указаниями.

3. Добавьте 25 г исследуемого образца в 225 мл забуференной пептонной воды и инкубируйте при 35 °C в течение 16-20 часов.

4. Засейте 0,1 мл водной культуры пептонов предварительного обогащения в 10 мл обогащающего бульона Раппапорта-Вассилиадиса (RV) и инкубируйте при 42 ± 1 °C в течение 24-48 часов.

5. Субкультивировать бульон, нанося штрих на чашки с агаром с бриллиантовым зелёным (модифицированным) CM0329. Инкубируйте при 35 ° C в течение 18-24 часов.

6. Колонии, демонстрирующие типичную морфологию колоний Salmonella, должны быть подтверждены биохимическими или серологическими методами.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду следует хранить при 2-8 °C вдали от солнечных лучей.

Внешний вид

Сухая среда: бледно-зелёный, сыпучий порошок.

Готовая среда: раствор синего цвета.