Лактозный агар с кристаллическим фиолетовым и желчью - Violet Red Bile Agar (VRBA) with MUG

Бульон модифицированный лаурил-сульфатный триптозный с MUG разработан для обеспечения возможности использования метода наиболее вероятного числа для подсчёта бактерий группы кишечной палочки, а также подсчёта предполагаемых Escherichia coli с помощью метода культивирования, включающего жидкую среду, содержащую MUG.

В составе бульона 4-метилумбеллиферил-ß-D-глюкуронид (MUG), который расщепляется ферментом ß-глюкуронидом с высвобождением 4-метилумбеллиферона. Этот сине-зелёный флуорофор демонстрирует сине-зелёную флуоресценцию, видимую при просмотре в длинноволновом ультрафиолетовом свете (366 нм).

Включение триптофана в состав бульона действует как субстрат для производства индола. Обе реакции характерны для Escherichia coli и поэтому могут использоваться для идентификации предполагаемой Escherichia coli.

Колиформные организмы потребляют лактозу с образованием газа.

Приготовление

Растворите 36,7 г модифицированного лаурилсульфат-триптозного бульона с MUG в 1 литре дистиллированной воды. Разлить в окончательные емкости, содержащие пробирки Дарема. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут.

Методика

Подготовьте достаточное количество разведений исходного образца, чтобы гарантировать, что пробирки с окончательным разведением дадут отрицательный результат. Засейте каждое разведение в пробирки с модифицированным лаурилсульфат-триптозным бульоном с MUG, содержащим перевёрнутые пробирки Дарема. Для метода наиболее вероятного числа засевайте каждое разведение в трёх повторностях.

Инкубируйте пробирки при 30 °C в течение 24-48 часов. Осмотрите пробирки на предмет помутнения среды, газообразования, флуоресценции и образования индола.

1. Пробирки, имеющие флюоресценцию, выделение газа и образование индола, указывают на предположительно наличие Escherichia coli.
2. Пробирки, имеющие выделение газа, указывают на присутствие бактерий группы кишечной палочки.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: раствор соломенного цвета.