Хромогенный агар для E.coli и колиформных бактерий 500 г

Выделение и подсчёт Escherichia coli и бактерий группы кишечной палочки является важным элементом определения безопасности пищевых продуктов, а также экологического мониторинга.

Определение активности ß-глюкуронидазы широко используется для дифференциации бактерий Escherichia coli среди других бактерий группы кишечной палочки, поскольку фермент, кодируемый геном lacZ, присутствует только Escherichia coli.

Колиформные бактерии способны метаболизировать лактозу, активность ß-глюкуронидазы, кодируемая геном lacZ, затем используется для дифференциации этой группы от других организмов, способных расти на селективной среде.

В результате образуются фиолетовые колони кишечная палочка, поскольку они способны расщеплять оба хромогена, а другие колиформные бактерии дают розовые колонии, поскольку они расщепляют только галактозидный хромоген.

Приготовление

Развести 28,1 г хромогенной среды в 1 литре дистиллированной воды. Осторожно доведите среду до кипения, чтобы она полностью растворилась. Далее либо разлейте среду в стерильные чашки Петри, либо держите расплавленную при 45 °C для дальнейшего использования.

Методика

Подготовьте образцы пищевых продуктов, разбавив образец в соотношении 1:5 или 1:10 (при необходимости) 0,1% (мас./об.) стерильной пептонной водой (CM0009), и гомогенизируйте.

Сильно загрязнённые пробы воды следует сначала разбавить раствором Рингера (BR0052) или CM0733, чтобы количество получить читаемое число колоний, например, 20-100 колоний.

Питьевую воду следует концентрировать либо центрифугированием, либо с использованием мембранных фильтров.

1. Поверхностное определение на чашках

Просушите поверхность подготовленных чашек Петри. Нанесите пипеткой 0,1 мл приготовленного образца на планшет и распределите по поверхности стерильным шпателем. Инкубируйте чашки в течение 24 часов при 37 °C.

2. Метод разливки

Внесите пипеткой 1 мл приготовленного образца на чашку Петри. Добавьте 15-20 мл охлаждённой до 45 °C среды. Осторожно покрутите тарелки, чтобы тщательно перемешать и дать застыть. Инкубируйте 24 часа при 37 °C.

3. Метод мембранной фильтрации

Просушите поверхность подготовленных чашек Петри. Отфильтруйте соответствующий объем пробы через мембрану. Поместите мембрану на поверхность чашки с агаром и избегайте захвата пузырьков воздуха под мембраной. Инкубируйте 24 часа при 37 °C.

Для всех методов подсчитайте количество розовых и фиолетовых колоний. Умножьте количество колоний на коэффициент разведения и выразите результат как количество колиформ и кишечной палочки на грамм образца или объем воды.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: прозрачный гель соломенного цвета.