Хромогенная селективная добавка для Bacillus сereus

Bacillus cereus, грамположительная аэробная спорообразующая палочковидная бактерия, широко распространена в природе. Легко выделяется из образцов почвы, пыли, зерновых культур, растений, шерсти животных, пресной воды и отложений. Поэтому неудивительно, что этот организм ассоциируется практически с каждым сельскохозяйственным сырьём. Способность образовывать споры обеспечивает выживание на всех этапах обработки пищевых продуктов, за исключением автоклавирования, и этот организм присутствует в большинстве сырьевых материалов, используемых при производстве пищевых продуктов.

Оксоидный хромогенный агар Bacillus cereus включает хромогенный субстрат 5-бром-4-хлор-3-индолил-ß-глюкопиранозид, который расщепляется ферментом ß -глюкозидазой, присутствующим в Bacillus cereus, в результате чего образуются сине-зеленые колонии. Полимиксин B подавляет большинство грамотрицательных организмов и некоторые грамположительные организмы, включая некоторые Bacillus, отличные от Bacillus cereus. Триметоприм, который также добавляется в среду, блокирует синтез фолиевой кислоты, необходимой для синтеза ДНК, и активен против многих грамположительных бактерий, включая Staphylococcus aureus, Enterococcus spp. и некоторые виды Bacillus. Было показано, что комбинация этих двух антибиотиков более эффективна, чем использование одного полимиксина B.

Приготовление

Развести 20,5 г в 500 мл дистиллированной воды. Хорошо перемешайте и доведите до кипения для полного растворения. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Охладить среду до 50 °C и асептически добавьте 1 флакон селективной добавки Chromogenic Bacillus cereus. Хорошо перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Методика

1. Приготовить 10 мас. % раствор исследуемого образца пищевого продукта в 0,1% пептонной воде (CM0009) или MRD (CM0733).

2. Гомогенизировать образец в течение 1 минуты.

3. Засеять 0,1 мл объёмов 10-1, 10-2 и 10-3 разведений гомогената на поверхность Чашки с хромогенным агаром Bacillus cereus.

4. Инкубируйте планшеты при 37 °C в течение 24 часов.

5. Проверьте типичные колонии Bacillus cereus.

6. Подтвердите предполагаемую идентификацию Bacillus cereus утверждённым методом, например, окраской по Граму.

7. Запишите результаты как количество колоний Bacillus cereus на грамм веса образца пищи.

Условия хранения и срок годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду хранить при температуре 2-8 °C не более 2х недель. Селективную добавку для Bacillus Cereus хранить при температуре 2-8 °C

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: гель светло-соломенного цвета.

Селективная добавка: белые лиофилизированные гранулы.