EC-бульон - EC Broth

EC Бульон - это селективная среда для определения фекальных колиформ и проведения подтверждающего теста для Escherichia coli в образцах пищевых продуктов и окружающей среды. Он также подходит для подсчёта предполагаемой кишечной палочки в молоке и молочных продуктах.

Escherichia coli - распространённый грамотрицательный микроорганизм, который может присутствовать в образцах пищи и воды. Присутствие клеток Escherichia coli может указывать на фекальное загрязнение, хотя их попадание в организм не всегда оказывает неблагоприятное воздействие на здоровье. Тем не менее, определённые штаммы кишечной палочки вызывают диарею, а также могут приводить к более серьёзным осложнениям.

Присутствие бактерий группы кишечной палочки в воде является индикатором фекального загрязнения.

Критерием идентификации кишечной палочки и фекальных колиформ является потребление лактозы с закислением среды и выделением газа в течение 24-48 часов при 44-45,5 °C, в зависимости от используемого метода и образца:

Приготовление

Растворите 18,5 г бульона в 500 мл дистиллированной воды. Разлейте по контейнерам, в которых находятся перевёрнутые пробирки Дарема. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Образование газа в результате потребления микроорганизмами лактозы определяется с помощью перевёрнутых трубок Дарема.

Методика

В составе среды забуференный лактозный бульон и соли желчных кислот № 3. Наличие в составе среды солей желчных кислот подавляет рост спорообразующих бактерий и энтерококков, но допускает рост бактерий группы кишечной палочки. Образование газа в среде в результате потребления лактозы осуществляется с помощью перевёрнутых трубок Дарема.

1. Молоко и молочные продукты /Предположительная идентификация Escherichia coli (ISO)

Пробирки с перевёрнутыми пробирками Дарема с лаурилтриптозным бульоном одинарной и двойной концентрации (CM0451) засеять образцами, как описано в стандартной методике. Инкубировать при 37 °C в течение 24-48 часов. Проверить газообразование.

Образцы, в которых наблюдалось образование газа, произвести засев в новую серию пробирок с пробирками Дарема, содержащих 10 мл EC бульона, и инкубировать при 44 °C в течение 24-48 часов.

Образцы, в которых наблюдалось образование газа, пересеять в пробирки с триптонной водой (CM0087), и инкубировать в течение 24-48 часов при 44 °C. Провести анализ на образование индола и рассчитать наиболее вероятное количество предполагаемой Escherichia coli.

2. Определение фекального загрязнения бактериями группы кишечной палочки

Засейте пробирки для ферментации ЕС бульона, содержащие перевёрнутые пробирки Дарема, и инкубируйте на водяной бане при 44,5±2 °C в течение 24 часов. Рост культуры, сопровождающийся образованием газа в течение 24 часов или менее, свидетельствует о фекальной контаминации образца.

3. Подтверждающий тест на Escherichia coli (FDA/BAM)

Из каждой пробирки с лаурилтриптозным бульоном (CM0451), в которой наблюдается образование газа в результате культивирования, перенесите по петле суспензии в в пробирки с ЕС бульоном, содержащие перевёрнутые пробирки Дарема. Инкубируйте при 45,5 °C и проверьте газообразование через 24 и 48 часов.

Содержимое пробирок, в которых наблюдается образование газа, наносят штрихами на агар EMB (CM0069) и инкубируют при 35 °C в течение 18-24 часов. Перенести 2 предполагаемых колонии с каждого планшета на PCA (CM0325), инкубировать 18–24 часа при 35 °C. Присутствие E.coli подтвердить морфологическим и биохимическим тестом.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок белого цвета.

Готовая среда: раствор соломенного цвета.