Бульон тетратионат-новобиоцин Мюллера-Кауфмана – Muller-Kauffmann Tetrathionate-Novobiocin Broth

Oxoid MKTT-n модифицирован с добавлением бычьей желчи и бриллиантового зеленого для повышения селективности. Добавление новобиоцина в дозе 40 мг на литр было позже описано для улучшения ингибирования видов Proteus.

Oxoid MKTT-n - селективная среда обогащения для выделения сальмонелл; состав соответствует ISO 6579: 20021.

Приготовление

Развести 89,5 г сухого бульона в 1 л дистиллированной воды, хорошо перемешать и довести до кипения. Охладите до температуры ниже 45 °C. Непосредственно перед применением добавляют 20 мл йодо-йодистого раствора, приготовленного растворением 25 г йодида калия в 10 мл воды, добавлением 20 г йода и последующим разбавлением стерильной водой до 100 мл. Также добавьте содержимое четырёх флаконов селективной добавки Oxoid Novobiocin (SR0181), восстановленной в соответствии с указаниями. Хорошо перемешайте и разлейте в стерильных контейнерах.

После инкубации образца в BPW (ISO) перенесите 1 мл бульона в 10 мл бульона MKTT-n и 0,1 мл в 10 мл бульона RVS (CM0866). Инкубируйте бульон MKTT-n при 37 ° C ± 1 ° C в течение 24 часов ± 3 часа и бульон RVS при 41,5 ° C ± 1 ° C в течение 24 часов ± 3 часа. Субкультивировать инкубированные бульоны MKTT-n и RVS на агар XLD (CM0469) и вторую агаровую среду по выбору и инкубировать ещё 24 часа ± 3 часа при 37 ° C ± 1 ° C. Предполагаемая сальмонелла должна быть подтверждена с помощью соответствующих биохимических и серологических методов. Полный метод см. В ISO 6579: 20021.

Методика

Добавьте примерно 10 г образца в 100 мл бульона Мюллера-Кауфмана. Энергично встряхните и немедленно поместите колбы со средой на водяную баню при 45 °C на 15 минут. Снимите колбы с водяной бани, не высушивая их, и поместите в инкубатор или другую водяную баню при 43 °C.

Субкультивировать бульон через 18-24 часа и снова через 48 часов. Возьмите одну петлю бульона с края поверхности жидкости и засевайте либо две чашки с агаром Oxoid Brilliant Green (модифицированный) CM0329 (диаметром 9 см).

Инкубируйте чашки при 35 ° C в течение 18-24 часов.

Условия хранения и сроки годности

Храните обезвоженную среду при температуре 10-30 ° C и используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную основу среды можно хранить до 2 недель при комнатной температуре, приготовленную среду в ее окончательной форме, содержащую раствор йода / йодида + селективную добавку новобиоцина SR0181, следует использовать свежей.

Внешний вид

Сухая среда: белый сыпучий порошок.

Готовая среда: Бледно-зелёная непрозрачная суспензия, которая при стоянии даёт тяжёлый осадок.