Бульон с бриллиантовым зелёным и 2% желчью - Brilliant Green Bile (2%) Broth

Желчь и бриллиантовый зелёный подавляет рост грамположительных микроорганизмов, бактерии группы кишечной палочки легко определяются по быстрому потреблению лактозы и образованию газа в среде.

Желчный бульон с бриллиантовым зеленым используется для анализа воды, молочных продуктов и пищевых продуктов4,5,6,7,8.

Реагент MUG BR0071 - Добавление 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида (MUG) BR0071 в эту среду улучшит обнаружение Escherichia coli. Подробнее см. MUG Reagent BR0071 в разделе «Биологические реагенты».

Приготовление

Растворите 40 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Хорошо перемешайте, разлейте по контейнерам с пробирками Дарема и стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут.

Для приготовления бульона в двойной концентрации нагрейте растворенный бульон при 100 °C в течение 30 минут.

Методика

Для определения присутствия Escherichia coli в образце, бульон с бриллиантовым зелёным и желчью инкубируют при 44 ± 1 °C в течение 48 часов. Мутность бульона и газообразование в перевернутой пробирке являются признаками роста Escherichia coli.

Тест на образование индола осуществляют при 44 °C в триптонной воде CM0087 или пептонной воде CM0009 для подтверждения идентичности Escherichia coli.

При анализе образцов воды если используются объёмы воды от <1 мл до 10 мл, важно не чрезмерно разбавлять среду. Таким образом, к 10 мл желчного бульона с бриллиантовым зелёным можно добавить 1 мл воды.

При анализе образцов воды объёмом от 10 мл воды, следует использовать желчный бульон с бриллиантовым зелёным двойной концентрации в равных объёмах. При инкубации при 35 °C в течение 48 часов образование газа предположительно указывает на бактерии группы кишечной палочки.

Для анализа пищевых продуктов, образец разводят десятикратно и добавляют в бульон в пропорции 1:10. Бульон двойной концентрации можно использовать для проб большого объёма. Инкубацию проводят при 44 °C в течение 48 часов для обнаружения кишечной палочки.

Обнаружение бактерий группы кишечной палочки осуществляется при 32 °C в течение 25-48 часов, а обнаружение психротрофных организмов группы кишечной палочки при 4 °C в течение 10 дней.

Помутнение среды желтовато-зелёного цвета с обильным газообразованием говорит о предположительном присутствии в образце Escherichia coli или бактерий группы кишечной палочки. Требуется проведение дальнейших анализов для подтверждения наличия данных микроорганизмов в образце.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок бледно-зелёного цвета.

Готовая среда: раствор зелёного цвета.