Агар висмут – сульфитный 10 флаконов – Bismuth Sulphite Agar

Агар висмут – сульфитный представляет собой модификацию исходной селективной среды для выделения и предварительной идентификации Salmonella typhi и других сальмонелл из сточных вод, воды, пищевых продуктов и других продуктов, предположительно содержащих эти патогены. В этой среде свежеосажденный сульфит висмута вместе с бриллиантовым зеленым действует как селективный агент, подавляя рост колиформных бактерий, одновременно допуская рост сальмонелл. Соединения серы обеспечивают субстрат для производства сероводорода, в то время как соли металлов в среде окрашивают колонию и окружающую среду в черный или коричневый цвет в присутствии сероводорода.
Атипичные колонии могут появиться, если среда сильно засеяна органическими веществами. Такую ситуацию можно предотвратить путём разведения образца в стерильном физиологическом растворе и используя супернатант для инокуляции.
Свежеприготовленная среда обладает сильным ингибирующим действием и подходит для сильно загрязненных образцов. Хранение разлитых чашек при 4 ° C в течение 3 дней приводит к изменению цвета среды на зеленый, что делает ее менее селективной с выделением небольшого количества сальмонелл.
Там, где предполагается небольшое количество сальмонелл, можно использовать методы обогащения.
Приготовление
Развести 20 г в 500 мл дистиллированной воды в колбе объёмом 1 л. Осторожно нагрейте при частом помешивании, пока среда не закипит, и кипятите на медленном огне в течение 30 секунд, чтобы агар растворился. Охладите до 50-55 ° C, хорошо перемешайте, чтобы суспензия диспергировалась, и разлейте по чашкам. Дайте среде застыть, не накрывая чашки. Большие объемы можно приготовить, если проявить большую осторожность и обеспечить достаточное свободное пространство.
Перед использованием просушите чашки, но следите за тем, чтобы не пересушить. Правильно приготовленные чашки должны иметь гладкую кремообразную непрозрачность бледно-соломенного цвета. На индикаторе не должно быть седиментации. НЕ ПЕРЕГРЕВАЙТЕ - НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.
Методика
Агар висмут – сульфитный может использоваться вместе с другими селективными агарами для выделения сальмонелл прямым посевом или из среды для обогащения.
Засейте непосредственно на агар висмут – сульфитный и один или несколько из следующих компонентов:
Дезоксихолат-цитратный агар CM0227 или DCLS-агар CM0393 XLD-агар CM0469 Агар с бриллиантовым зеленым CM0329 Агар МакКонки № 3 CM0115
В то же время засевают обогащающий бульон, например, селенитовый бульон CM0395 + биселенит натрия LP0121 или тетратионатный бульон CM0343. Субкультура на сульфитном агаре висмута и любой другой селективной среде после 12-18 часов инкубации. Осмотрите чашки после 18 часов инкубации и субкультивируйте подозрительные колонии в среде для идентификации, например. Железный агар Клиглера CM0033.
Все отрицательные планшеты следует инкубировать в течение 48 часов.
Условия хранения и сроки годности
Храните обезвоженную среду при температуре 10-30 ° C и используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке.
ВНИМАНИЕ:
Из-за содержания реактивных и гигроскопичных веществ дегидратированный сульфитный висмут-агар быстро портится при воздействии воздуха. Обычно на это указывает агрегация в твёрдую не рыхлую массу и развитие коричневой окраски. Восстановленная из такого материала среда имеет коричневый цвет, не становится зелёной при хранении и характеризуется потерей дифференциальных и селективных свойств. По этой причине порошок следует хранить в прохладном, сухом месте, а после использования контейнер должен быть плотно закрыт.
Внешний вид
Сухая среда: бледно-зеленый, сыпучий порошок.
Готовая среда: гель бледно-зеленого цвета.