Агар SIM - SIM Medium

Среда SIM предназначена для определения трёх характеристик: образование сероводорода, образование индола и подвижность микроорганизмов.

Полужидкий агар с индолом применяется для дифференциации Klebsiella, Enterobacter и Serratia. Образование сероводорода указывает на присутствие кишечных бактерий и помогает различать сальмонеллы и шигеллы. Сульфатредуцирующие бактерии будут продуцировать сероводород, и дальнейшее химическое замещение приведёт к образованию сульфида железа вдоль линии инокуляции.

Присутствие сбраживаемых сахаров может подавить ферментный механизм, который образует сероводород в результате образующихся кислых продуктов, и поэтому сахара не включаются в среду. Oxoid SIM Medium можно использовать вместе с Triple Sugar Iron Agar CM0277 для оценки способности культуры метаболизировать лактозу, сахарозу и глюкозу.

Синтез индола из триптофана позволяет идентифицировать кишечные бактерии. Например, если это не необычная форма, культура сальмонелл никогда не производит индол из триптофана в количествах, обнаруживаемых в обычных тестах. Триптон добавлен в среду, поскольку это пептон, богатый триптофаном, и после инкубации индол можно идентифицировать по комплексной реакции красного красителя с одним из нескольких реагентов, например реактивом Ковача, который состоит из амилового спирта, пара-диметиламинобензальдегида и концентрированной соляной кислоты.

Использование только 0,35% агара в среде приводит к получению полутвердой среды, идеальной для исследования подвижности. Неподвижные организмы будут расти только вдоль линии прививки, тогда как подвижные виды будут расти дальше от неё.

Приготовление

Развести 30 г в 1 литре дистиллированной воды и вскипятить до полного растворения среды. Разлить в готовые ёмкости и стерилизовать автоклавированием в течение 15 минут при 121 °C.

Методика

Среду следует разлить в пробирки или флаконы и, когда она остынет, один раз засеять чистой культурой, вставив прямую проволоку примерно на одну треть глубины среды. Если для обнаружения индола используется бумага, то она вставляется между ватной пробкой или крышкой и стенкой контейнера.

Засеянную среду инкубируют при 35 °C в течение 18 часов или дольше, если необходимо, и исследуют на подвижность, продукцию сероводорода и, наконец, продукцию индола из триптофана.

Для проведения теста на способность микроорганизмов синтезировать индол:

1. Добавьте в пробирку 0,2 мл реагента Ковача и дайте постоять 10 минут. Темно-красный цвет является положительным тестом на образование индола. Отсутствие изменения исходного цвета реагента является отрицательным результатом.

Или

2. Подвесьте полоску фильтровальной бумаги, пропитанной раствором насыщенной щавелевой кислоты и высушенной, над средой.

Индол, образованный микроорганизмами, летуч и приводит к образованию розового окрашивания бумаги

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду следует хранить при температуре 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: полутвердый гель соломенно-зелёного цвета.