Агар с глюкозой, кристаллическим фиолетовым и желчью 5 кг - Violet Red Bile Glucose Agar

При исследовании пищевых продуктов было рекомендовано обнаружение более определённой группы организмов, Enterobacteriaceae, которые ферментируют глюкозу с образованием кислоты и / или газа. Помимо колиформ, в эту группу входят сальмонеллы и шигеллы, не ферментирующие лактозу, и энтеротоксигенные кишечные палочки. Он также содержит организмы, такие как клебсиелла и цитробактер, которые более устойчивы к нагреванию, чем бактерии группы кишечной палочки, и поэтому являются лучшими индикаторами сбоя процессов, использующих минимальное количество тепла.

Среды, содержащие соли желчных кислот, обладают внутренней токсичностью для Enterobacteriaceae даже для клеток, которые не подвергались стрессу.

Существенные различия наблюдались среди шести коммерческих препаратов фиолетово-красного желчного агара в отношении продуктивности Enterobacteriaceae и интенсивности их метаболизма. В сочетании с Oxoid компоненты среды были исследованы составлена следующая спецификация:

1. Утверждённые среды должны быть прозрачными и давать колонии удовлетворительного размера. Они должны дать воспроизводимый подсчёт типичных колоний Enterobacteriaceae.

2. При проверке на внутреннюю токсичность с помощью анаэробного метаболического теста с использованием штамма Yersinia enterocolitica (серотип 03) в качестве чувствительного индикатора среда должна способствовать адекватному росту, образованию кислоты и, при необходимости, адекватному газообразованию.

3. Среда должна соответствовать уровню подтверждения типичных колоний, то есть количеству колоний, подтверждённых как Enterobacteriaceae, делённому на количество протестированных колоний.

Фиолетово-красный желчный глюкозный агар был разработан для удовлетворения всех этих критериев и соответствует рекомендациям ISO.

Приготовление

Развести 38,5 г в 1 литре дистиллированной воды. Доводить до кипения. Продолжайте кипятить в течение 2 минут или в течение минимального времени, необходимого для полного растворения, и убедитесь, что не осталось пятен нерасплавленного агара. Дальнейшая стерилизация не требуется и не желательна. Хорошо перемешайте и разлейте по пробиркам или тарелкам.

Методика

Подготовьте серию разведений образцов так, чтобы был включён по крайней мере один, который даст 100-200 колоний из аликвоты объемом 1 мл. Перенесите аликвоты по 1 мл каждого разведения в чашки Петри диаметром 9 см, используя по 2 чашки для каждого разведения. Добавьте 15 мл среды, охладите до 47 °C. Осторожно покрутите пластины 3 раза по часовой стрелке и 3 раза против часовой стрелки. После того, как среда затвердеет, залейте 10 мл той же среды и дайте ей затвердеть. Переверните чашки и инкубируйте при> 42 °C в течение 18 часов, 32 °C в течение 24-48 часов или 4 °C в течение 10 дней в зависимости от групп энтеробактерий, подлежащих выделению.

Наложение агара обеспечивает анаэробные условия, подавляющие рост неферментативных грамотрицательных бактерий. Он также способствует ферментации глюкозы, что способствует образованию чётко видимых пурпурных колоний, окружённых пурпурным ореолом.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду следует хранить при 2-8 °C и использовать как можно более свежей.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенно-розового цвета.

Готовая среда: гель фиолетового цвета.