- Биотех
- Каталог
- Питательные среды и контрольные штаммы
- Питательные среды
- Сухие питательные среды
- Агар МРС 500 г - MRS Agar (De Man, Rogosa, Sharpe)
Агар МРС 500 г - MRS Agar (De Man, Rogosa, Sharpe)
Агар MRS для культивирования молочнокислых бактерий.
Агар МРС 500 г - MRS Agar (De Man, Rogosa, Sharpe)
Описание
Условия хранения и сроки годности
Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Приготовленную среду следует хранить при температуре 2-8 °C.
Внешний вид
Сухая среда: порошок темно-соломенного цвета
Готовая среда: гель янтарного цвета.
Состав MRS был разработан де Маном, Рогозой и Шарпом для замены томатного сока в составе питательной среды для поддержания роста лактобацилл даже тех штаммов, которые показали плохой рост в существующих средах.
Агар и бульон MRS были разработаны для стимулирования роста «молочнокислых бактерий», которые включают виды следующих родов: Lactobacillus, Streptococcus, Pediococcus и Leuconostoc. Все эти виды могут производить молочную кислоту в значительных количествах. Это грамположительные, каталаза- оксидазаотрицательные, и они требовательны к своим питательным веществам. Росту значительно способствуют микроаэробные условия.
Обычно «молочнокислые бактерии» демонстрируют замедленный рост и меньший размер колоний, чем другие микроорганизмы. Они могут перерасти в неселективной среде, особенно если требуется инкубация в течение 2-4 дней.
Выбор может быть сделан путем корректировки pH, таким образом, лактобациллы будут переносить более низкие уровни pH, чем стрептококки (pH 5,0-6,5), а педиококки и лейконостоки лучше всего растут в этом диапазоне. Ингибиторы основных групп микрофлоры-конкурента включают ацетат талла, ацетат натрия, сорбиновую кислоту, уксусную кислоту, нитрит натрия, циклогексимид и полимиксин.
Лактобациллы микроаэрофильны и обычно требуют слоистых пластин для аэробного культивирования на твёрдой среде. Подводные или поверхностные колонии могут быть компактными или перистыми, небольшими, непрозрачными и белыми.
Приготовление
Развести 62 г в 1 литре дистиллированной воды. Прокипятите для полного растворения. Разлить по пробиркам, бутылкам или колбам и стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут.
Положительный результат | Ожидаемый результат |
Lactobacillus gasseri ATCC® 19992* | Хороший рост; колонии бледно-соломенного цвета |
Отрицательный результат |
|
Незасеянная среда | Без изменений |
*Этот организм доступен в виде Culti-Loop.
Состав | г/л |
Пептон | 10,0 |
Порошок «Лаб-Лемко» | 8,0 |
Дрожжевой экстракт | 4,0 |
Глюкоза | 20,0 |
Моноолеат сорбитана | 1 мл |
Гидрофосфат калия | 2,0 |
Ацетат натрия 3H2O | 5,0 |
Цитрат триаммония | 2,0 |
Сульфат магния 7H2O | 0,2 |
Сульфат марганца 4H2O | 0,05 |
Агар | 10,0 |
pH 6,2 ± 0,2 |
Продукты, которые необходимо исследовать на содержание лактобацилл, мацерируют или разводят в разбавителе, например, растворе Рингера четвертичной концентрации, а дальнейшие разведения производят в бульоне MRS.
В стерильные чашки добавляют разбавленные образцы объёмом 1 мл, в чашку наливают расплавленный агар MRS (45 °C) и тщательно перемешивают.
Когда среда затвердеет, на поверхность наливают ещё один слой незасеянного агара MRS, чтобы получить пластину-пластину.
Чашки инкубируют, как описано ниже. Важно, чтобы в атмосфере над агаром присутствовало достаточное количество паров влаги, поскольку сушка пластин во время инкубации приведёт к концентрации факторов отбора на поверхности и сделает среду ингибирующей. Присутствие углекислого газа стимулирует рост, поэтому чашки следует инкубировать в атмосфере с 5% CO2. Среда MRS является селективной для лактобацилл, но может происходить некоторый рост лейконостоков и педиококков.
42 ° C термофильный: 2 дня
35 ° C мезофильный: 2 дня
30 ° C + 22 ° C мезофильно-психротрофный: 2 + 1 сут.
25 ° C психротрофический: 3 дня
Инкубация проводится в анаэробных или микроаэрофильных условиях.
Выберите изолированные колонии на агаризованной среде и окрасьте мазок от каждой, чтобы идентифицировать предполагаемые колонии Lactobacillus; перенесите их в бульон MRS. Преимущество этого бульона состоит в том, что любые другие микроорганизмы, изначально находившиеся в спящем состоянии в селективном агаре, не имеют возможности размножаться, как это может происходить в неселективном бульоне. Инкубируйте бульоны при температуре и времени, аналогичных тем, которые используются для агара MRS; затем их можно исследовать под микроскопом и далее субкультивировать в агаре MRS для последующего подтверждения и идентификации видов.
Применения
Культивирование молочнокислых бактерий.
Мы поможем вам подобрать и купить необходимое оборудование для лаборатории. Компания «МИЛЛАБ» работает с производителями напрямую, потому у нас объективные цены на всю продукцию и устройства!
Вы можете не печатать документ полностью, а выбрать страницы с описанием интересующих вас моделей в параметрах печати