Агар дезоксихолатный - Desoxycholate Agar

Дезоксихолатный агар - это дифференциальная среда для прямого подсчёта бактерий группы кишечной палочки в молочных продуктах. Его также можно использовать для выделения кишечных патогенов из ректальных мазков, фекалий или других образцов.

Среду можно использовать в технике «наливной тарелки» или в качестве среды с посевом на поверхность. Тонкий слой незараженного дезоксихолатного агара, налитый на поверхность гелеобразной «разливочной тарелки», помогает в последующем подсчёте.

Приготовление

Развести 45 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Доведите до кипения над пламенем, чтобы среда полностью растворилась. Перемешайте, чтобы предотвратить обугливание. Данная среда является термочувствительной. Запрещается автоклавировать и перегревать.

Методика

Подсчёт бактерий группы кишечной палочки в молоке и сливках

1. Внесите пипеткой 1–4 мл образца (или десятичного разведения образца) в стерильную чашку Петри.
2. Охладите свежеприготовленный дезоксихолатный агар до 42-44 °C и добавьте по 10-20 мл в каждую чашку.
3. Перемешайте содержимое чашки, осторожно наклоняя и вращая.
4. Дайте чашкам застыть и вылейте на них 3-4 мл незараженного дезоксихолатного агара.
5. Когда покрытие застынет, переверните чашки и инкубируйте их в течение 18-24 часов при 35 ° C.
6. Подсчитайте все темно-красные колонии диаметром не менее 0,5 мм и рассчитайте количество колоний кишечной палочки на миллилитр или грамм исходного образца.

Выделение энтеробактерий

Для этой цели рекомендуется использовать дезоксихолатный агар параллельно с другими средами для посева.

Слегка засевайте чашку с дезоксихолатным агаром образцом фекалиц, ректальным мазком или накопительной культурой. Инкубируйте 18-24 часа при 35 °C и исследуйте.

Микроорганизмы кишечного происхождения, не способные потреблять лактозу, образуют бесцветные колонии. Микроорганизмы, не способные потреблять лактозу, не кишечного происхождения ингибируются дезоксихолатом натрия.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок бледно розового цвета.

Готовая среда: гель розового цвета.