Добавка RFP для агара Байрд-Паркера – RPF Supplement

Описание
Кроличий агар с фибриногеном плазмы (RPF Agar) является модификацией среды Байрд-Паркера и рекомендуется для селективного выделения, подсчета и подтверждения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов и других образцов.
Состав агара RPF имеет основу агара Байрд-Паркера, которая была специально разработана для реанимации поврежденных клеток. Эта среда отличается от среды Байрда-Паркера тем, что эмульсия яичного желтка заменена фибриногеном, кроличьей плазмой и ингибитором трипсина. Фибриноген был добавлен для усиления коагулазной реакции в RPF Agar. Была выбрана кроличья плазма, и было обнаружено, что она более специфична по активности коагулазы по сравнению с другими источниками плазмы. Ингибитор трипсина был добавлен для предотвращения фибринолиза.
Добавка RPF представляет собой модификацию оригинальной рецептуры, в которой содержание теллурита калия было снижено в четыре раза, то есть с 0,01% до 0,0025% мас. / об. Это сокращение было необходимо, поскольку в лабораториях Oxoid было обнаружено, что некоторые штаммы S. aureus были чувствительны к теллуриту калия при использовании 0,01% мас. / об. в RPF Agar. Было обнаружено, что эта модификация агара RPF дает рост и селективность, сравнимые с таковыми, достигнутыми на среде Байрда-Паркера. Повышенная продуктивность RPF Agar также была подтверждена другими лабораториями. Снижение концентрации теллурита калия в агаре RPF приводит к образованию S. aureus белых, серых или черных колоний, окружённых непрозрачным ореолом преципитации, т.е. коагулазной реакции.
Приготовление
Восстановите один флакон, как указано, асептически добавьте содержимое в 90 мл стерильной агаровой основы Байрда-Паркера (RPF) CM0961, охлаждённой до 48 ° C. Хорошо перемешайте и сразу же используйте.
Методика
Метод посева на чашки:
1. Подготовьте чашки с агаром RPF согласно инструкции.
2. Обработайте образец пищи в гомогенизаторе или блендере Waring, используя рекомендуемый размер образца и разбавитель.
3. В отдельные чашки вносят 0,1 мл подготовленных образцов и при необходимости проводят последующие разведения.
4. Инкубируйте при 35 ° C и исследуйте через 24 и 48 часов инкубации.
5. Подсчитайте все колонии с непрозрачным ореолом осадков вокруг них. Не ограничивайте подсчет черными колониями.
6. Укажите количество коагулазоположительных стафилококков, выделенных на грамм пищи.
Метод залитой чашки:
1. Приготовьте агар RPF, как указано, и выдержите при 48 ° C.
2. Обработайте образец пищи в гомогенизаторе или блендере Waring, используя рекомендуемый размер образца и разбавитель.
3. Добавьте 1 мл подготовленного образца (исходная суспензия и последующее десятичное разведение) в каждую стерильную чашку Петри.
4. Добавьте 20 мл стерильного агара RPF и осторожно перемешайте.
5. Инкубируйте при 35 ° C и исследуйте через 24–48 часов.
6. Подсчитайте все колонии, окруженные непрозрачным ореолом осадков.
7. Укажите количество коагулазоположительных стафилококков, выделенных на грамм пищи.
Условия хранения и сроки годности
Хранить при температуре 2-8 °C.