Набор Remel™ E. coli Screen с индолом Ковача

ρ-нитрофенил β-D-глюкопиранозидуроновая кислота (PGUA), бесцветное соединение, гидролизуется β-глюкуронидазой с образованием нитрофенила, соединения жёлтого цвета. В индольном тесте фермент триптофаназа атакует молекулу триптофана на его боковой цепи, оставляя ароматическое кольцо в форме индола.

Реакция происходит в процессе конденсации, образованной кислотным расщеплением белка. ρ-диметиламинобензальдегид соединяется с индолом с образованием комплекса красного цвета.

Приготовление

Этот продукт готов к использованию, дополнительная подготовка не требуется.

Методика

E. coli Screen предназначен для тестирования колоний, демонстрирующих типичную морфологию и потребляют лактозу на агаре MacConkey или EMB. Возраст тестовых колоний должен составлять 18–24 часа, они должны находиться в чистой культуре или иметь хорошо изолированные колонии.

1. Получите видимый тяжёлый посевной материал, используя деревянную палочку-аппликатор или стерильную петлю.
2. Проткните пробирку с экраном на E. coli рядом со стеклом.
3. Инкубируйте пробирку в аэробных условиях при 35–37 °C в течение от одного до четырёх часов.
4. Обратите внимание на изменение цвета на ярко-желтый, указывающее на положительную реакцию PGUA.
5. После интерпретации реакции PGUA добавьте в пробирку две (2) капли индольного реагента Ковача.
6. Обратите внимание на изменение цвета на красный, что указывает на положительную реакцию на индол.

Условия хранения и сроки годности

Этот набор следует хранить при температуре от 2 до 8 °C в темноте. Перед использованием дайте нагреться до комнатной температуры. Перед использованием не инкубируйте.