Латексный тест Remel™ RIM E. coli O157:H7

E. coli O157: H7 Latex Test включает 3 латексных реагента. Частицы в каждом реагенте покрыты разными антителами: одно против E. coli серотипа O157, другое против E. coli серотипа H7, а третье - нормальным кроличьим глобулином, в качестве контрольного латекса.

Когда частицы Test Latex смешиваются со свежими колониями штаммов E. coli O157 и / или H7, происходит иммунохимическая реакция, приводящая к агглютинации. Отсутствие агглютинации указывает на то, что тестируемая колония не является E. coli O157: H7. Реагент Control Latex определяет неспецифическую агглютинацию.

Приготовление

Этот продукт готов к использованию, дополнительная подготовка не требуется.

Методика

Перед использованием дайте реагентам нагреться до комнатной температуры. Тщательно перемешайте латексные реагенты, осторожно помешивая. Держите флаконы вертикально и дозируйте только свободно падающие капли. Не меняйте местами компоненты из разных партий тестовых наборов.

1. Допустимые колонии и среды включают только:
   
   а. Колонии, не потребляющие сорбит (NSFC), выделенные на сорбитовом агаре МакКонки (SMAC) для тестирования на E. coli O157.
   
   б. Субкультура NSFC, растущая на кровяном агаре для тестирования на E. coli H7.
2. Для каждой исследуемой колонии внесите одну каплю тестового латекса (зелёный колпачок) в лунку тестового предметного стекла.
3. Таким же образом нанесите одну каплю контрольного латекса E. coli (нейтральный колпачок) в отдельную лунку тестового предметного стекла.
4. Используя пластиковую палочку (входит в комплект), удалите часть NSFC с планшета SMAC и эмульгируйте в тестовом латексе E. coli O157 на предметном стекле. Распределите более двух третей зоны реакции. Выбросьте пластиковую палочку. Используя новую пластиковую палочку, повторите процесс с оставшимся NSFC и эмульгируйте в контрольном латексе E. coli на предметном стекле.
5. Вращайте предметное стекло круговыми движениями в 3-х плоскостях в течение 1 минуты или до появления агглютинации.
6. Если происходит агглютинация с тестовым латексом E. coli O157 и контрольный латекс отрицательный, нанесите колонию штрихом на чашку с кровяным агаром, инкубируйте в течение ночи и переходите к шагу 7. Если агглютинация происходит и с тестовым латексом, и с контрольным латексом, переходите к шагу 8. Утилизируйте тестовый слайд после прочтения.
7. После инкубации в течение ночи (18-24 часа) повторите тест. Эмульгируйте колонию из чашки с кровяным агаром в капле тест-латекса E. coli H7 (синий колпачок). Контрольный латекс на этом этапе не используется. Не используйте кипячёные элементы с латексом H7 Test Latex.
   
   а. Агглютинация указывает на присутствие E. coli O157: H7.
   
   б. Если с латексом H7 не происходит агглютинации, повторно протестируйте изолят после прохождения через подходящую подвижную среду (с последующим пересевом на чашку с кровяным агаром), прежде чем сделать вывод об отсутствии антигена H7.
8. Любой тестовый изолят, агглютинирующий как с тестовым латексом E. coli O157, так и с контрольным латексом E. coli, следует обрабатывать следующим образом:
   
   а. Развести тестовый изолят в 0,5 мл стерильного физиологического раствора в стеклянной пробирке. Мутность суспензии должна быть > 1 стандарта МакФарланда или эквивалентной.
   
   б. Поместите тюбик в кипящую водяную баню на 10 минут. Дайте пробирке остыть до комнатной температуры. Повторно протестируйте изолят, используя 30-50 мкл суспензии, с тестовым латексом O157 и контрольным латексом.
   
   i) Если происходит агглютинация с тестовым латексом E. coli O157, а не с контрольным латексом, пересейте изолят в чашку с кровяным агаром. После инкубации в течение ночи проведите тест с помощью H7 Test Latex, как в шаге 7.
   
   ii) Если после кипячения происходит агглютинация как с тестовым латексом E. coli O157, так и с контрольным латексом, тест не даёт результатов. Отправьте изоляты, биохимически подтвержденные как E. coli, в референс-лабораторию для дальнейшего тестирования.

Условия хранения и сроки годности

Храните продукт в оригинальной упаковке при 2-8 °C до истечения срока годности. Не замораживать. Не инкубировать.