Набор RapID™ YEAST PLUS System

Система RapID Yeast Plus состоит из панелей (1) RapID Yeast Plus, (2) RapID Yeast Plus Reagent A и (3) RapID Yeast Plus Reagent B. Каждая панель RapID Yeast Plus имеет несколько реакционных полостей, отформованных по периферии пластика.

Реакционные полости содержат обезвоженные реагенты, а панель позволяет одновременно вносить в каждую полость заранее определённое количество посевного материала. Суспензия тестируемого организма в RapID Inoculation Fluid используется в качестве инокулята, который регидратирует и инициирует тестовые реакции. После инкубации панели каждую тестовую полость исследуют на реактивность, отмечая появление цвета.

В некоторых случаях в тестовые полости необходимо добавлять реагенты для изменения цвета. Полученный образец положительных и отрицательных результатов теста используется в качестве основы для идентификации тестируемого изолята путём сравнения результатов теста с образцами реактивности, хранящимися в базе данных Electronic RapID Compendium (ERICTM), или с использованием RapID Yeast Plus Differential Chart.

Тесты, используемые в системе RapID Yeast Plus System, основаны на микробной деградации определённых субстратов, обнаруживаемой различными индикаторными системами.

Используемые реакции представляют собой комбинацию обычных тестов и хромогенных тестов с одним из субстратов.

Методика

Приготовление инокулята

1. Исследуемые организмы должны быть взяты из суточной чистой культуры и проверены окраской по Граму.
   Примечание:
   — С помощью системы RapID Yeast Plus следует тестировать только организмы, которые имеют морфологию дрожжей и схожие ростовые характеристики.
2. Рекомендуется следующая среда: агар с декстрозой Сабуро (SDA) - рецептура Эммонса.
   Культуры, используемые для приготовления посевного материала, должны быть инкубированы при 30 °C и должны быть возрастом 48 часов. Использование носителей, отличных от рекомендованных, может снизить производительность теста.
3. С помощью ватного тампона или посевной петли приостановите достаточный рост культуры на агаровой пластине в жидкости для посева RapID (2 мл) для достижения визуальной мутности, как указано в разделе «Примечания», с помощью карты посева RapID Yeast Plus.
   Примечания:
   — Выберите хорошо изолированные колонии тестируемого изолята и постепенно добавьте в жидкость для посева RapID, чтобы избежать комкования и чрезмерного посева. Продолжайте добавлять организм до тех пор, пока мутность суспензии полностью не сотрёт черные линии на карте. Когда черные линии на карте перестанут быть видны, подготовка посевного материала завершена
   — Суспензии, значительно менее мутные, чем требуемая плотность посевного материала, будут вызывать аберрантные реакции.
   — Суспензии, немного более мутные, чем требуемая плотность посевного материала, не влияют на характеристики теста и рекомендуются для исходных культур и штаммов для контроля качества. Однако значительно более мутные суспензии ухудшают характеристики теста.
   — Суспензии следует тщательно перемешать и при необходимости встряхнуть.
   — Суспензии следует использовать в течение 15 минут после приготовления.
4. В агаризованной чашке можно выполнить посев на чистоту, а также дополнительные испытания, которые могут потребоваться с использованием полной петли тестовой суспензии из пробирки с посевной жидкостью. Инкубируйте планшет в течение 24-72 часов при 30 °C.

Засев панелей RapID Yeast Plus

1. Отогните крышку панели над портом посева, потянув за язычок с надписью «Очистите для посева» вверх и влево.
2. С помощью пипетки аккуратно перенесите все содержимое пробирки с посевной жидкостью в верхний правый угол панели. Закройте инокуляционный порт на панели, вернув на место отрывной язычок.
3. После добавления тестовой суспензии и, удерживая панель на ровной поверхности, наклоните панель назад от реакционных полостей примерно на 45 градусов.
4. Откинув панель назад, осторожно покачивайте панель из стороны в сторону, чтобы равномерно распределить посевной материал по задним перегородкам, как показано ниже.
5. Поддерживая ровное горизонтальное положение (лучше всего достигается прижиманием верхней части стола к дну реакционной полости), медленно наклоняйте панель вперёд в направлении реакционных полостей, пока посевной материал не потечёт вдоль перегородок в реакционные полости. Это должно удалить весь посевной материал из задней части панели.
   Примечание:
   — Если панель наклоняется слишком быстро, в стыке тестовой полости может скапливаться воздух, что ограничивает движение жидкости.
6. Верните панель в горизонтальное положение. При необходимости осторожно постучите по панели на столе, чтобы удалить воздух, застрявший в полостях.

Примечания:

• Осмотрите тестовые полости, которые не должны иметь пузырьков и быть равномерно заполненными. Незначительные неровности заполнения испытательных полостей допустимы и не повлияют на выполнение теста. Если панель сильно не заполнена, необходимо засеять новую панель, а неправильно заполненную панель выбросить.
• Завершите инокуляцию каждой панели, получающей посевную жидкость, перед инокуляцией дополнительных панелей.
• Не позволяйте посевному материалу оставаться в задней части панели в течение длительного времени без завершения процедуры.

Инкубация панелей RapID Yeast Plus

Инкубируйте засеянные панели при 30 °C в инкубаторе без CO2 в течение 4 часов. Для простоты использования панели можно инкубировать в инкубационных лотках из ДСП, поставляемых с набором.

Примечания:

• Если инкубатор с температурой 30 °C, без CO2, недоступен, панели RapID Yeast Plus можно инкубировать при контролируемой комнатной температуре.
• Инкубация панелей RapID Yeast Plus Panels при 35–37 ° C может привести к аномальным реакциям.

Оценка результатов RapID Yeast Plus

Панели RapID Yeast Plus содержат 18 реакционных полостей, которые дают 18 результатов тестов. Тесты, требующие реагента (полости 7-14 и 16-18), обозначены рамкой вокруг них.

1. Удерживая панель RapID Yeast Plus на столе, снимите крышку с этикеткой над реакционными полостями, потянув нижний правый язычок вверх и влево.
2. Добавьте в указанные полости следующие реагенты:
   — Добавьте 1 каплю реагента RapID Yeast Plus Reagent A в полости с 7 (NAGA) по 14 (PCHO).
   — Добавьте 1 каплю RapID Yeast Plus Reagent B в полости с 16 (PRO) по 18 (LGY).
3. После добавления RapID Yeast Plus Reagent B подождите не менее 30 секунд, но не более 1 минуты для проявления цвета.
   Примечание:
   — Полости со слоями цвета можно смешать с помощью аппликатора перед считыванием.
4. Прочтите и оцените тестовые полости слева направо, используя руководство по интерпретации. Запишите оценки в соответствующие поля в форме отчёта.
5. Ссылайтесь на микрокод, полученный в форме отчёта в ERIC, для идентификации.

Условия хранения и сроки годности

Храните RapID Yeast Plus System в оригинальной упаковке при 2–8 °C до истечения срока годности. Перед использованием дайте продукту нагреться до комнатной температуры.

НЕ меняйте местами реагенты в разных системах RapID. Удалите только то количество панелей, которое необходимо для тестирования. Закройте пластиковый пакет и быстро верните его к температуре 2-8 °C.

Панели необходимо использовать в тот же день, когда они были сняты с хранения. Жидкость для посева RapID должна храниться в оригинальном контейнере при комнатной температуре (20-25 °C) до использования.