Набор RapID™ ONE System

Система Remel RapIDTM ONE - это качественный микрометод, использующий обычные и хромогенные субстраты для идентификации Enterobacteriaceae и других оксидазонегативных грамотрицательных бактерий.

Система RapID ONE состоит из (1) панелей RapID ONE и (2) реагента RapID ONE. Каждая панель RapID ONE имеет несколько реакционных полостей, отформованных по периферии одноразового пластикового лотка. Реакционные полости содержат обезвоженные реагенты, а лоток позволяет одновременно вносить в каждую полость заранее определённое количество посевного материала.

Суспензия тестируемого организма в RapID Inoculation Fluid используется в качестве инокулята, который регидратирует и инициирует тестовые реакции. После инкубации панели каждую тестовую полость исследуют, отмечая появление цвета. В некоторых случаях в тестовые полости необходимо добавлять реагенты для изменения цвета.

Полученный образец положительных и отрицательных результатов теста используется в качестве основы для идентификации тестового изолята путём сравнения результатов с образцами реактивности, хранящимися в базе данных, с использованием электронного справочника RapID Compendium (ERICTM) или RapID ONE Differential Диаграмма.

Тесты, используемые в системе RapID ONE, основаны на микробной деградации определённых субстратов, обнаруживаемой различными индикаторными системами. Используемые реакции представляют собой комбинацию обычных тестов и хромогенных тестов с одним субстратом.

Методика

Приготовление инокулята:

1. Исследуемые организмы должны быть взяты из чистой культуры с известным Грам типом, без фермента оксидазы
   
   Примечания:
   — С помощью системы RapID ONE следует тестировать только отрицательные по оксидазе и грамотрицательные бактерии. Бациллы с положительной реакцией на оксидазу следует тестировать с помощью системы RapID NF Plus.
   — Тест на оксидазу следует интерпретировать с осторожностью при использовании бактерий из дифференциальных агаров, содержащих красители, которые могут помешать интерпретации.
2. Тестируемые организмы могут быть получены из различных селективных и неселективных сред для выращивания агара. Рекомендуются следующие типы носителей:
   — Неселективная среда: триптиказо соевый агар (TSA) с 5% овечьей кровью или без неё; Питательный агар.
   — Дифференциальная или селективная среда: агар Hektoen Enteric (HE); MacConkey Agar; Агар с эозин-метиленовым синим (EMB); Дезоксихолатный агар; Salmonella-Shigella (SS) Agar.
   Примечания:
   — Чашки, используемые для приготовления посевного материала, предпочтительно должны быть возрастом 18-24 часа. Медленнорастущие штаммы анализировать через 48 часов.
   — Использование носителей, отличных от рекомендованных, может снизить производительность теста.
3. С помощью ватного тампона или инокуляционной петли приостановите достаточный рост культуры чашки с агаром в жидкости для быстрого посева (2 мл), чтобы добиться визуальной мутности, равной стандарту мутности по Макфарланду № 2 или эквивалентному.
   Примечания:
   — Суспензии, значительно менее мутные, чем по стандарту МакФарланда №2, будут вызывать аномальные реакции.
   — Бактериальные суспензии, которые немного мутнее, чем стандарт МакФарланда № 2, не повлияют на характеристики теста и рекомендуются для исходных культур и штаммов контроля качества. Однако суспензии, приготовленные с мутностью, намного превышающей стандарт МакФарланда №2, могут ухудшить характеристики теста.
   — Суспензии следует тщательно перемешать и при необходимости встряхнуть.
   — Суспензии следует использовать в течение 15 минут после приготовления.
4. В чашку с агаром можно внести посев на чистоту и любые дополнительные испытания, которые могут потребоваться с использованием полной петли тестовой суспензии из пробирки с посевной жидкостью. Инкубируйте планшет не менее 18–24 часов при температуре 35–37 °C.

Засев панелей RapID Yeast Plus:

1. Отогните крышку панели над портом посева, потянув за язычок с надписью «Очистите для посева» вверх и влево.
2. С помощью пипетки аккуратно перенесите все содержимое пробирки с посевной жидкостью в верхний правый угол панели. Закройте инокуляционный порт на панели, вернув на место отрывной язычок.
3. После добавления тестовой суспензии и, удерживая панель на ровной поверхности, наклоните панель назад от реакционных полостей примерно на 45 градусов.
4. Откинув панель назад, осторожно покачивайте панель из стороны в сторону, чтобы равномерно распределить посевной материал по задним перегородкам, как показано ниже.
5. Поддерживая ровное горизонтальное положение (лучше всего достигается прижиманием верхней части стола к дну реакционной полости), медленно наклоняйте панель вперёд в направлении реакционных полостей, пока посевной материал не потечёт вдоль перегородок в реакционные полости. Это должно удалить весь посевной материал из задней части панели.
   Примечание. Если панель наклоняется слишком быстро, в стыке тестовой полости может скапливаться воздух, что ограничивает движение жидкости.
6. Верните панель в горизонтальное положение. При необходимости осторожно постучите по панели на столе, чтобы удалить воздух, застрявший в полостях.

Примечания:

• Осмотрите тестовые полости, которые не должны иметь пузырьков и быть равномерно заполненными. Незначительные неровности заполнения испытательных полостей допустимы и не повлияют на выполнение теста. Если панель сильно не заполнена, необходимо засеять новую панель, а неправильно заполненную панель выбросить.
• Завершите инокуляцию каждой панели, получающей посевную жидкость, перед инокуляцией дополнительных панелей.
• Не позволяйте посевному материалу оставаться в задней части панели в течение длительного времени без завершения процедуры.

Инкубация панелей RapID Yeast Plus

Инкубируйте засеянные панели при 35-37 °C в инкубаторе без CO2 в течение 4 часов. Для простоты использования панели можно инкубировать в инкубационных лотках из ДСП, поставляемых с набором.

Примечания:

• Если инкубатор с температурой 30 °C, без CO2, недоступен, панели RapID Yeast Plus можно инкубировать при контролируемой комнатной температуре.
• Инкубация панелей RapID Yeast Plus Panels при 35–37 ° C может привести к аномальным реакциям.

Оценка результатов RapID Yeast Plus:

Панели RapID ONE содержат 18 реакционных полостей, которые дают 19 результатов. Полость 18 для тестирования является бифункциональной, в ней размещены два отдельных теста в одной полости.

Бифункциональные тесты оцениваются перед добавлением реагента, что даёт первый результат теста, а затем та же полость снова оценивается после добавления реагента, чтобы получить второй результат теста.

Для тестовых полостей с 15 по 17 требуется реагент RapID ONE, они обозначены рамкой. Бифункциональный тест 18, в котором используется RapID Spot Indole Reagent, обозначается рамкой, обведённой вокруг теста, требующего реагента.

1. Удерживая панель RapID ONE за основание, снимите крышку с этикеткой над реакционными полостями, потянув нижний правый язычок вверх и влево.
2. Добавьте 2 капли реагента RapID ONE в полости с 15 (PRO) по 17 (PYR).
3. Считайте и оцените полости от 1 (URE) до 18 (ADON) слева направо, используя руководство по интерпретации. Запишите результаты теста в соответствующие поля формы отчёта, используя код теста над полем для бифункционального теста.
4. Добавьте 2 капли реагента RapID Spot Indole Reagent в полость 18 (ADON / IND).
   Примечание. Следует использовать только реагент RapID Spot Indole Reagent (R8309002). Реагенты Ковача или Индол Эрлиха не дадут удовлетворительных результатов.
5. Подождите не менее 10 секунд, но не более 2 минут для проявления цвета.
6. Прочтите и оцените тестовую полость 18 (IND). Запишите результат в соответствующем поле формы отчёта.
7. Ссылайтесь на микрокод, полученный в форме отчёта в ERIC, для идентификации.

Условия хранения и сроки годности

Храните RapID Yeast Plus System в оригинальной упаковке при 2–8 °C до истечения срока годности. Перед использованием дайте продукту нагреться до комнатной температуры.

НЕ меняйте местами реагенты в разных системах RapID. Удалите только то количество панелей, которое необходимо для тестирования. Закройте пластиковый пакет и быстро верните его к температуре 2-8 °C.

Панели необходимо использовать в тот же день, когда они были сняты с хранения. Жидкость для посева RapID должна храниться в оригинальном контейнере при комнатной температуре (20-25 °C) до использования.