Набор RapID™ CB PLUS System

• + положительный;
• – отрицательный;
• V переменная

Реактив RapID CB Plus (входит в комплект) (15 мл / флакон)

• ρ-Диметиламиноциннамальдегид 0,06 г

RapID раствор для засева (R8325106, продаётся отдельно) (2 мл)

• KCl 6,0 г
• CaCl2 0,5 г
• деминерализованная вода 1000,0 мл

Реактив RapID Nitrate A (R8309003, поставляется отдельно) (15 мл/флакон)

• сульфаниловая кислота 8,0 г
• ледяной уксусной кислоты 280,0 мл
• деминерализованной воды 720,0 мл

Реагент RapID Nitrate B (R8309004, поставляется отдельно) (15 мл/флакон)

• н, н-диметил-1-нафтиламин 6,0 г
• ледяной уксусной кислоты 280,0 мл
• деминерализованной воды 720,0 мл

Приготовление инокулята

1. Исследуемые микроорганизмы должны быть выращены в чистой культуре и определён их Грам тип.
   Примечание:
   — НЕЛЬЗЯ тестировать спорообразующие грамположительные палочки в системе RapID CB Plus.
2. Тестовые организмы можно культивировать на обычных лабораторных средах, обычно используемых для коринеформ. Рекомендуются следующие типы сред: 5-7% агар с овечьей кровью, приготовленный на основе триптической сои, Columbia или Brain Heart Infusion; Колумбийский агар CNA.
   Примечания:
   — Возраст культур, используемых для приготовления посевного материала, должен составлять менее 72 часов. Чашки, выращенные в течение 24 часов, можно использовать, если имеется достаточный рост. Чашки, которым исполнилось 72 часа, можно использовать для очень медленно растущих штаммов.
   — Использование питательных сред, отличных от рекомендованных, может снизить производительность теста.
3. Проведите тест на каталазу изолята. Запишите результат на крышке панели.
4. Наблюдайте за тестовым изолятом на образование жёлтого пигмента. Удалите несколько колоний с поверхности агаризованной чашки ватным тампоном или тампоном с полиэфирным наконечником и проверьте цвет пигмента на тампоне. Если организм производит жёлтый пигмент, отметьте «плюс» в поле «Жёлтый пигмент» на крышке панели.
   Примечание:
   — Регистрируйте только жёлтую пигментацию. Возникновение любого другого цвета должно быть зарегистрировано как отрицательное в пигментном пространстве.
5. С помощью ватного тампона или инокуляционной петли приостановите достаточный рост культуры с агаризованной чашки в жидкости для быстрого посева (2 мл), чтобы добиться визуальной мутности, равной стандарту мутности по Макфарланду № 4 или эквивалентному.

Примечания:

• Суспензии, значительно менее мутные, чем у McFarland №4, могут вызывать аномальные реакции.
• Бактериальные суспензии, которые немного мутнее, чем стандарт МакФарланда №4, не влияют на характеристики теста и рекомендуются для исходных культур и штаммов контроля качества. Однако суспензии, приготовленные с мутностью, намного превышающей стандарт МакФарланда № 4, могут ухудшить характеристики теста.
• Суспензии следует тщательно перемешать и при необходимости встряхнуть.
• Суспензии следует использовать в течение 15 минут после приготовления.

6. В чашку с агаром можно внести посев на чистоту и любые дополнительные испытания, которые могут потребоваться с использованием полной петли тестовой суспензии из пробирки с посевной жидкостью. Инкубируйте планшет не менее 18–24 часов при температуре 35–37 °C.

Засев панелей RapID CB PLUS

1. Отогните крышку панели над портом посева, потянув за язычок с надписью «Очистите для посева» вверх и влево.
2. С помощью пипетки аккуратно перенесите все содержимое пробирки с посевной жидкостью в верхний правый угол панели. Закройте инокуляционный порт на панели, вернув на место отрывной язычок.
3. После добавления тестовой суспензии и, удерживая панель на ровной поверхности, наклоните панель назад от реакционных полостей примерно на 45 градусов.
4. Откинув панель назад, осторожно покачивайте панель из стороны в сторону, чтобы равномерно распределить посевной материал по задним перегородкам, как показано ниже.
5. Поддерживая ровное горизонтальное положение (лучше всего достигается прижиманием верхней части стола к дну реакционной полости), медленно наклоняйте панель вперёд в направлении реакционных полостей, пока посевной материал не потечёт вдоль перегородок в реакционные полости. Это должно удалить весь посевной материал из задней части панели.
   Примечание:
   — Если панель наклоняется слишком быстро, в стыке тестовой полости может скапливаться воздух, что ограничивает движение жидкости.
6. Верните панель в горизонтальное положение. При необходимости осторожно постучите по панели на столе, чтобы удалить воздух, застрявший в полостях.

Примечания:

• Осмотрите тестовые полости, которые не должны иметь пузырьков и быть равномерно заполненными. Незначительные неровности заполнения испытательных полостей допустимы и не повлияют на выполнение теста. Если панель сильно не заполнена, необходимо засеять новую панель, а неправильно заполненную панель выбросить.
• Завершите инокуляцию каждой панели, получающей посевную жидкость, перед инокуляцией дополнительных панелей.
• Не позволяйте посевному материалу оставаться в задней части панели в течение длительного времени без завершения процедуры.

Инкубация панелей RapID CB Plus

Инкубируйте засеянные панели при 35–37 °C в инкубаторе без CO2 в течение не менее 4 часов, но не более 6 часов. Для простоты использования панели можно инкубировать в инкубационных лотках из ДСП, поставляемых с набором.

Оценка результатов RapID CB Plus

CAT (каталаза) и PIG (желтый пигмент) не выполняются в панели RapID CB Plus. Однако они записываются как часть оценки микрокода.

1. Удерживая панель RapID CB Plus на столе, снимите крышку с этикеткой над реакционными полостями, потянув нижний правый язычок вверх и влево.
2. Добавьте 2 капли реагента RapID CB Plus в полости с 12 (PRO) по 16 (LEU).
3. Добавьте 1 каплю реагента RapID Nitrate A и 1 каплю реагента RapID Nitrate B в полость 18 (NIT).
4. Подождите не менее 30 секунд, но не более 1 минуты для проявления цвета.
5. Прочтите и оцените тестовые полости слева направо, используя инструкцию. Запишите оценки в соответствующие поля формы отчёта.
6. Запишите оценки каталазы и пигмента на крышке панели в соответствующие поля формы отчеёа.
7. Ссылайтесь на микрокод, полученный в форме отчёта в ERIC, для идентификации.

RapID CB Plus System, RapID Nitrate A Reagent и RapID Nitrate B Reagent до истечения срока годности должны храниться в оригинальных упаковках при 2-8 °C. Перед использованием дайте продуктам нагреться до комнатной температуры.

НЕ меняйте местами реагенты в разных системах RapID. Удалите только то количество панелей, которое необходимо для тестирования. Закройте пластиковый пакет и быстро верните его к температуре 2-8 °C.

Панели необходимо использовать в тот же день, когда они были сняты с хранения. Жидкость для посева RapID должна храниться в оригинальном контейнере при комнатной температуре (20-25 °C) до использования.