Диск с L-пирролидонил-β-нафтиламидом/Эскулином

Remel PYR/Esculin Disk - это пропитанный реагентом диск, рекомендуемый для использования в качественных процедурах для быстрой предполагаемой идентификации стрептококков группы A и энтерококков.

Фермент пирролидонилпептидаза гидролизует субстрат L-пирролидонил-β-нафтиламид (PYR) с образованием β-нафтиламина. После добавления N, N-диметиламинциннамальдегида (реагент PYR) образуется красный цвет. Эскулин гидролизуется по связи β-глюкозы с образованием двух продуктов: эскулетина и глюкозы.

Эскулин флуоресцирует в ультрафиолетовом свете на длине волны 360 нм, тогда как продукт гидролиза эскулетин - нет. Оба реактивных субстрата, PYR и эскулин, для стабильности лиофилизируют в дисковой форме.

Методика

Используйте суточные культуры. Убедитесь, что культура чистая.

1. Выполните соответствующие процедуры, чтобы убедиться, что исследуемый изолят является стрептококком или энтерококком.
2. Поместите диск PYR / Esculin на поверхность чашки с агаром.
3. С помощью стерильной петли или палочки-аппликатора засевайте небольшую область диска выделенными колониями.
4. Закройте чашку Петри крышкой и инкубируйте в аэробных условиях в течение 15 минут при 35–37 °C. Не переворачивайте чашку.
5. Используя длинноволновый ультрафиолетовый свет, наблюдайте флуоресценцию диска в затемнённой комнате.
6. После интерпретации реакции эскулина добавьте на диск одну каплю реагента PYR и наблюдайте за появлением розового до красного цвета в течение 1-2 минут.

Примечание. Если выполняется только тест PYR, диски с инокулированными организмами можно инкубировать при комнатной температуре в течение 5 минут перед добавлением реагента PYR. Если проводится только тест с эскулином, как для анаэробов, диски с инокулированными организмами необходимо инкубировать в течение 15 минут при 35–37 °C.

PYR:

Положительный результат – Розовое или красное окрашивание в течение 1-2 мин

Отрицательный результат - Отсутствие окрашивания в течение 1-2 мин

Эскулин:

Положительный результат – Отсутствие флуоресценции

Отрицательный результат – Ярко-синяя флуоресценция

Условия хранения и сроки годности

Этот продукт готов к использованию, дополнительная подготовка не требуется. Храните продукт в оригинальной упаковке при температуре 2-8 °C до истечения срока годности. Перед использованием дайте продукту нагреться до комнатной температуры. Не инкубируйте перед использованием. Беречь от света.

Состав

• L-пирролидонил-β-нафтиламид
• Эскулин