Описание

4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG) является чувствительным и селективным субстратом для обнаружения активности β-глюкуронидазы, которая присутствует в большинстве E. coli (97%).

BactiCard E. coli состоит из двух отдельных тестовых кружков для MUG и индола (IND). В присутствии фермента β-глюкуронидазы 4-метилумбеллиферон высвобождается из субстрата, 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронида. Это соединение (4-метилумбеллиферон) обладает высокой флуоресценцией и может быть обнаружено длинноволновым ультрафиолетовым светом.

В индольном тесте триптофан и ρ-диметиламинобензальдегид служат субстратами для обнаружения фермента триптофаназы. Этот фермент атакует молекулу триптофана, производя индол, который реагирует с ρ-диметиламинобензальдегидом с образованием красного цвета.

Приготовление

Этот продукт готов к использованию, дополнительная подготовка не требуется.

Методика

Тестовые колонии, приемлемые для тестирования с помощью BactiCard E. coli, являются оксидазо-отрицательными грамотрицательными бациллами. Используйте тестовые колонии из чистых 18-72-часовых культур, растущих на кровяном агаре.

1. Наклейте на тест-карту идентификацию образца.
2. Засейте только одну колонию на каждую тестовую карточку.
3. Добавьте одну (1) каплю жидкости для регидратации только в тестовый кружок MUG. Не перенасыщайте тестовую область.
4. Засейте каждый тестовый кружок видимым посевным материалом тестовой культуры используя палочку-аппликатор (входит в комплект).
5. Инкубируйте при комнатной температуре в течение 15 минут.
6. Наблюдайте за кружком IND-теста на появление красного цвета, указывающего на положительный результат теста.
7. Добавьте одну (1) каплю реагента MUG в тестовый кружок MUG.
8. Наблюдайте за тестовым кружком MUG в затемнённой комнате с помощью длинноволнового ультрафиолетового света для ярко-синей флуоресценции, указывающей на положительный результат теста.

Тест на синтез индола:

Положительный результат: изменение окрашивания на красный

Отрицательный результат: отсутствие изменения окраски

Тест MUG:

Положительный результат: ярко-синяя флуоресценция

Отрицательный результат: отсутствие флуоресценции

Условия хранения и сроки годности

Храните продукт в оригинальной упаковке при 2-8 °C до истечения срока годности. Не замораживать и не перегревать. Перед использованием дайте продукту достигнуть комнатной температуры. Не инкубируйте перед использованием.

После открытия храните неиспользованные тестовые карты при 2-8 °C в пакете из фольги. Уплотнение для защиты от влаги.

Состав набора

1. Карточки BactiCard на E. coli (25–5 комплектов по 5 шт.)
   Состав: 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид, триптофан, ρ-диметиламинобензальдегид.
2. Регидратирующая жидкость (1 флакон, 6,0 мл) с консервантом.
3. Реагент MUG (1 флакон, 6,0 мл) 4% гидроксид натрия.
4. Палочки-аппликаторы (1 флакон).
5. Инструкции по применению