Описание

Маннит-лизин агар с кристалл - фиолетовым и бриллиантовым зеленым используется для селективного выделения сальмонелл из фекалий и пищевых продуктов. Визуальное обнаружение очень небольшого количества штаммов, продуцирующих сероводород, легко осуществим благодаря характерному внешнему виду колоний.

Концентрация Mg ++ является критической для максимального роста сальмонелл на агаре MLCB.

Серотипы сальмонелл, у которых высокая частота H2S-отрицательных штаммов, например, Salmonella sendai, Salmonella berta, Salmonella pullorum и Salmonella senftenberg могут образовывать атипичные бледные колонии. MLCB Agar не подходит для Salmonella typhi и Salmonella paratyphi A из-за ингибирующей концентрации бриллиантового зелёного.

Среда может быть засеяна непосредственно образцом или накопительной культурой. Селективность относительно мала, и на её характеристики могут отрицательно повлиять сильно загрязнённые образцы. Из-за этих ограничений не следует использовать только агар MLCB.

MLCB Agar указывается в качестве среды для посева после обогащения модифицированным полутвёрдым Rappaport Vassiliadis (MSRV) CM0910 для выделения Salmonella spp. из человеческих фекалий.

Агар MLCB отлично подходит для выделения H2S-положительных сальмонелл после обогащения в бульоне Раппапорта-Вассилиадиса (RV) CM0669.

Сальмонеллы растут в виде больших пурпурно-черных колоний из-за образования сероводорода. Маннитол потребляется микроорганизмами, и результирующее падение pH инициирует декарбоксилирование лизина, которое контролирует дальнейшее снижение pH и способствует потемнению.

MLCB Agar не зависит от метаболизма лактозы и поэтому рекомендуется при исследовании ферментирующих лактозу сальмонелл (Salmonella arizona).

Атипичные штаммы Salmonella, которые производят мало сероводорода или не производят его совсем, растут в виде лилово-серых колоний и могут образовывать центральный чёрный «бычий глаз».

Для облегчения обнаружения этих атипичных штаммов следует также использовать агар бриллиантового зеленого (модифицированный) CM0329 или висмут-сульфитный агар CM0201.

Большинство контаминирующих микроорганизмов развиваются в виде небольших бесцветных колоний.

Приготовление

Развести 49,0 г в 1 литре дистиллированной воды. Перемешайте и осторожно доведите до кипения при частом помешивании, чтобы среда полностью растворилась. Охладить до 50 ° C и разлить примерно по 20 мл в стерильные чашки Петри.

НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ.

Методика

Перед использованием просушите поверхность агара.
Обильно инокулируйте среду образцом или накопительной культурой и инкубируйте в течение 18-24 часов при 35 °C.

Проверьте наличие типичных больших пурпурно-черных колоний H2S-положительных сальмонелл. Тщательно ищите H2S-отрицательные штаммы, которые нетипично растут в виде больших лилово-серых колоний с кратерами в центре. Пропорция может иметь чёрный «бычий глаз».

Выберите все колонии, предположительно относящиеся к Salmonella spp. и подтвердите биохимическими и серологическими исследованиями.

Условия хранения и срок годности

Храните обезвоженную среду при температуре 10-30 ° C и используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке.
Подготовленные чашки со средой хранить при 2-8 ° C.

Внешний вид

Сухая среда: бледно-зелёный, сыпучий порошок.
Готовая среда: гель фиолетового цвета.