Селективная добавка для 500 мл среды

Модифицированная среда CCDA была разработана для замены крови в составе среды углем, сульфатом железа и пируватом натрия. Повышенная селективность достигается использованием цефоперазона в составе селективной добавки.

Повышенная скорость выделения может быть достигнута, если планшеты инкубируются при 37 °C, а не при 42 °C. Амфотерицин B был добавлен в состав среды для подавления роста дрожжей и грибов при 37 °C.

Приготовление

Развести 22,75 г основы селективного агара без крови в 500 мл дистиллированной воды и довести до кипения для растворения. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Остудить до 50 °C. С соблюдением правил асептики добавьте 1 флакон CCDA Selective Supplement SR0155, приготовленного в соответствии с инстуркцией. Хорошо перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Методика

1. Приготовьте селективный агар Campylobacter без крови в соответствии с инструкцией.
2. Эмульгирейте примерно 0,5 г образца в 5 мл стерильной 0,1% -ной пептонной воды до получения примерно разведения 1:10.
3. Засейте селективную среду ватными тампонами так, чтобы образовались отдельные изолированные колонии.
4. Инкубируйте чашки в атмосфере, состоящей приблизительно из 5-6% кислорода, 10% углекислого газа и 84-85% азота, в течение 48 часов при 37 °C. Рекомендуется использование набора Oxoid Gas Generating Kit для кампилобактерий (BR0056) в сочетании с Oxoid Anaerobic Jar (HP0011) и активным катализатором (BR0042). Для меньшего объема используйте AnaeroJar в сочетании с набором Oxoid Gas Generating Kit для кампилобактерий (BR0060). В качестве альтернативы используйте CampyGen CN0025A или CN0035A, которые не требуют использования катализатора или добавления воды.

Колониальная морфология кампилобактерий может использоваться в качестве ориентира для идентификации на уровне видов. Штаммы Campylobacter jejuni образуют серые влажные плоские колонии.

Некоторые виды могут иметь зелёный оттенок или сухой вид, с металлическим блеском или без него. Штаммы Campylobacter coli обычно имеют кремово-серый цвет, влажные, слегка приподнятые и часто образуют отдельные колонии.

Колонии имеют тенденцию к скоплению при первоначальном выделении из клинических образцов.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Селективную добавку хранить в темноте при 2-8 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить до 2 недель при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок чёрного цвета.

Готовая среда: гель чёрного цвета.