Селективная добавка Болтона

Селективный бульон Болтона предназначен для предварительного обогащения Campylobacter в образцах пищевых продуктов.

Campylobacter - это грамотрицательные микроаэрофильные организмы спиралевидной формы, которые могут присутствовать в сыром молоке, неочищенной воде, неправильно обработанной пище и недоваренном мясе, птице и моллюсках. Потребление этих организмов людьми может привести к ряду клинических заболеваний, от временного бессимптомного заражения до тяжёлой дизентерии.

Симптомы энтерита Campylobacter включают диарею, боли в животе, тошноту, лихорадку, головную и мышечную боль. Campylobacter является одной из наиболее частых причин бактериального гастроэнтерита у людей, минимальная инфекционная доза может составлять всего 500-800 клеток.

Бульон для селективного обогащения Болтона содержит питательные вещества, помогающие реанимировать сублетально поврежденные клетки, и разработан таким образом, чтобы избежать микроаэрофильных условий культивирования.

Первоначальная инкубация проводится при температуре 30–37 °C, в зависимости от типа исследуемого продукта. После предварительного обогащения температуру инкубации повышают до 42 °C, чтобы повысить селективное давление на конкурирующие организмы.

Добавление метабисульфита натрия и пирувата натрия в состав бульона Болтона обеспечивает нейтрализацию образующихся в процессе культивирования токсичных соединений, а также увеличивают аэротолерантность культуры. Антибиотики, содержащиеся в селективной добавке Болтона, оптимизируют селективность в отношении Campylobacter spp.

Ванкомицин - активен в отношении грамположительных микроорганизмов, цефоперазон - преимущественно активен против грамотрицательных. Триметоприм - активен против широкого спектра грамотрицательных и грамположительных организмов. Циклогексимид - активен против дрожжей.

Приготовление

Развести 13,8 г сухой питательной среды Болтона в 500 мл дистиллированной воды. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут. Остудить до 50 °C. С соблюдением правил асептики добавьте 25 мл замороженной лошадиной крови SR0048 и 1 флакон селективной добавки Болтона, приготовленной в соответствии с инструкцией. Хорошо перемешайте и разлейте по стерильным флаконам с завинчивающейся крышкой.

Методика

1. Поместите 25 г анализируемого образца в 225 мл бульона для селективного обогащения Болтона (приготовленного, как описано выше) и гомогенизируйте смесь. Бульон для селективного обогащения Болтона не требует инкубации в микроаэробной среде, но должен использоваться во флаконах с завинчивающейся крышкой, которые заполнены до 20 мм от верха.
2. Инкубируйте 4 часа при 37 °C, затем инкубируйте при 42 ° C. Бульон можно субкультивировать через 24 часа и 48 часов либо на модифицированном CCDA (CM0739 + SR0155), либо на агаре Престона (CM0689 + SR0117 + SR0048) 4.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Селективную добавку хранить в темноте при 2-8 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить до 2 недель при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: раствор соломенного цвета содержащий частицы чёрного цвета.