Селективная добавка А Перфрингенс

В среде используется сульфадиазин (100 мкг/мл), олеандомицин фосфат (0,5 мкг/мл) и сульфат полимиксина B (10 МЕ/мл), включённые в состав в виде лиофилизированных добавок SR0076 и SR0077 для обеспечения высокой степени селективности и специфичности в отношении Clostridium. perfringens.

Метабисульфит натрия и цитрат железа (III) аммония используются в качестве индикатора восстановления сульфита Clostridium perfringens, который образует черные колонии на этой среде.

Сульфитредуцирующие бактерии, кроме Clostridium perfringens, такие как сальмонеллы, Proteus и Citrobacter freundii, а также стафилококки и Bacillus spp., подавляются на агаре OPSP.

Преимущество агара Perfringens Agar (OPSP) заключается в подавлении роста Clostridium bifermentans и Clostridium butyricum. Эти сульфитредуцирующие организмы легко растут на агаре Shahidi-Ferguson Perfringens Agar (SFP) и на агаре TSN в виде черных колоний со склонностью к распространению и затемнению всей поверхности среды.

Энтерококки будут расти на агаре Perfringens Agar в виде белых колоний, которые легко отличить от больших черных колоний Clostridium perfringens.

Приготовление

Развести 22,8 г сухой среды в 500 мл дистиллированной воды и осторожно довести до кипения до полного растворения. Стерилизовать автоклавированием при 121 °C в течение 15 минут.

Дайте остыть до 50 °C и асептически добавьте содержимое одного флакона каждой из добавок A и B Perfringens Agar (OPSP), которые были повторно гидратированы в соответствии с инструкцией. Хорошо перемешать и разлить по стерильной посуде.

Методика

1. Приготовьте среду в соответствии с инструкцией.
2. Приготовьте чашки Петри, содержащие примерно 25 мл на чашку, используя аликвоты по 1 мл подходящей серии разведений гомогенизированного анализируемого образца. Перед застыванием хорошо перемешайте.
3. Колонии Clostridium perfringens не почернеют при поверхностном засеве агара, только если посевной материал покрыт слоем агара.
4. Инкубируйте планшеты при 35 °C в течение 18-24 часов используя для создания анаэробных условий культивирований BR0038 в обычном газовом сосуде. В качестве альтернативы используйте AnaeroGen AN0025 или AN0035. AnaeroGen не требует добавления воды или катализатора.
5. Clostridium perfringens можно увидеть как большие черные колонии (диаметром 2-4 мм) в глубине агара. Случайные колонии Enterococcus faecalis могут расти на агаре Perfringens Agar (OPSP) в виде небольших бесцветных колоний, которые легко отличить от Clostridium perfringens.

Условия хранения и сроки годности

Сухую среду хранить при температуре 10-30 °C и использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.

Приготовленную среду можно хранить при 2-8 °C.

Внешний вид

Сухая среда: сыпучий порошок соломенного цвета.

Готовая среда: гель соломенного цвета.